本文建立了虎杖中五种活性成分:虎杖苷、白藜芦醇、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素、大黄素甲醚的高效液相色谱分析方法。色谱柱为 Agilent Zorbax SB C18 柱(4.6×250 mm,5 μm),流动相为乙腈(A)和水(B),梯度洗脱程序为:0~40 min,15.0~50.0% A;40~60 min,50.0~90.0% A。柱温为 40 ℃,检测波长为 290 nm,流速为 1.0 mL/min。五种成分线性良好(R>0.999),保留时间相对标准偏差(RSD)介于 0.14~1.67%,峰面积 RSD 介于 0.96~2.96%,加标回收率介于 96.8~104.7%。优化了虎杖的提取条件,最佳条件为 60%乙醇超声提取 30 min。对 10 批虎杖样品分析结果表明:虎杖苷和大黄素-8-O-β-D-葡萄苷是虎杖乙醇提取物中两种含量最高的活性成分,含量范围分别为 9.80~20.42 mg/g 和 5.56~24.45 mg/g。白藜芦醇和大黄素的含量范围分别为 1.07~5.94 mg/g和 3.79~17.85 mg/g,而大黄素甲醚含量为 0.57~1.69 mg/g。该高效液相色谱法重复性好、精密度高,可用于虎杖中五种活性成分的同时测定。